使用組織切片機切片不易，但該避的坑你不能不懂！

　　病理實驗看似簡單，實際上稍不注意細節，使用組織切片機就會漏洞百出，不同組織如何保存？不同切片有何區別？刀法需要慢慢練，但該避的坑你不能不懂！

　　

　　今天遠湘生物匯總了那些關于組織切片機進行病理切片的問題，看小編如何搞定這些實驗難題。

　　

　　一、組織如何保存？

　　

　　普通病理用固定液（多聚甲醛）保存；免疫組化、免疫熒光實驗不宜固定時間太久。

　　

　　二、不同組織都用一個脫水流程嗎？

　　

　　不同組織，其結構不同，脫水流程也有是區別的

　　

　　三、石蠟包埋切片一般切的厚度是多少？冰凍切片切多厚？

　　

　　冰凍切片厚度為6-10um；石蠟切片為4-6um。

　　

　　四、冰切出現裂痕的原因？

　　

　　可能是防卷板沒放好，冷凍切片機的溫度一般是零下10到15℃；還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問題，不同組織切片機里也要不同溫度需要注意一下。

　　

　　五、為什么切片總是脫片？

　　

　　1、粘附劑因素在制作組織學和病理學石蠟切片時，一般用甘油蛋白做粘附劑，但若甘油蛋白配制的時間過長，蛋白質變性，甘油蛋白的粘附作用即降低，可導致組織切片與載玻片粘附不牢，切片一進入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來。

　　

　　2、溫度的影響常規石蠟切片染色，溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來，立即進入室溫的純酒精清洗，這樣組織一下從37降至4℃左右，一冷一熱，熱脹冷縮，造成組織容易從載玻片上脫落下來。

　　

　　3、浸蠟時間的影響，組織取材后在脫水，浸蠟時間和包埋溫度上掌握不夠準確，特別是腺體組織比較嬌嫩，稍有過頭組織就變脆，在染色過程中就很容易出現脫片現象。